這一章敘述了耶穌最偉大的祈禱，自從16世紀的西特雷奧（D. Citreo）稱之為「大司祭的祈禱」以來，教會傳統就這樣稱呼這一章。內容是聖父與聖子之間深切的交流，顯出這位父是愛，而這位子是完全地孝順服從。
耶穌祈求光榮（1-11）：「時刻到了」，耶穌的一生，是為了這個最後的時刻。耶穌所祈求的光榮，正是復活的光榮，這光榮包括了所有的門徒，以及一切如同聖子懷着信德迎接這啟示並結出愛果的人。
「永恆的生命」的意思，並不在於暗示一個無限的時間和空間，而在於此時此世與復活主的共融合一。所以，信徒在現世已經開始活這個永恆的生命，這是預備當這世界結束之時，將會圓滿地實現的永生。因此，任何一項愛的行為，若是憑着耶穌的愛而行，並能反映出祂的愛的模樣，這行為都會成為超越時空、恆久存留的永生一部份。
在4-10節，默觀耶穌一生透過實行天父交託給祂的工程，便是圓滿地「光榮天主」。不過，天父的工程要如何、在何時，並在何處才會完成呢？福音已提供了答案（參閱19:28-30），在十字架上最尊榮的時刻，耶穌完美地滿全了天父的工程。
耶穌為自己的門徒祈禱（12-19）：幸好有耶穌這位聖子，使舊約中天主與人隔絕並使人恐懼的形象（參閱出3:1-6），終於變為一位可親的天父。耶穌祈求天父「因祢的名」保全祂的門徒，意思是保全他們的信德常活潑有力，邁向與天主圓滿的共融合一，「願他們合而為一」。門徒除非透過與聖子的共融，並在天主內重生（1:13；3:3-5），便不能合而為一。因為這合一的基礎和模範，是聖父與聖子共融合一的愛。
第14節論啟示的恩賜，以及這世界的仇恨。「世界」是指那是反對耶穌的一切。從這角度來看，世界與耶穌的團體屬於兩個相反的極端，永遠不能相容的現實狀況（參閱15:18-19）。
這篇祈禱的核心是懇求天主，使門徒透過受派遣的使命而得到聖化（17-19）。這是前後一致的主題，因門徒的聖化和使命，將會光榮耶穌。
耶穌為將來的信徒祈禱（20-26）：耶穌的祈禱從祂所派遣到世界上的宗徒小組身上（17:18），擴展到那些因他們的福傳和宣講而相信耶穌的人身上。整篇祈禱由始至終顯出一個主題：派遣和使命。這種派遣和使命的根源是天父，祂派遣了耶穌，而耶穌再派遣祂的門徒，為了將祂的救恩通傳給世界。而「世界」有擬人化的意義，代表着整個人類。
耶穌將要完成祂在歷史上的使命，但是教會的使命，剛剛開始進入世界，並邁向未來。然而，教會並不孤單，因為天父不斷聖化和領導教會；聖子以祂的話和賜予生命的臨在，將教會的子女聚集一起；聖神透過見證的門徒和領受先知使命的門徒，使教會堅強。
「願他們合而為一」，滿全的合一有兩個層面。第一個層面是教會內在的合一（ad intra），意思即是團體必須深化自身的信、望、愛和聖德，並在耶穌基督內、藉着基督邁向與天父更深的結合。第二個層面是派遣往外傳福音的使命（ad extra），在後來的經文內清楚地說明了：好使世人知道是祢派遣了我（21）。在團體內的眾人，憑着愛而聚合為一體，可讓世人認出這位聖子的臨在，並明白祂是聖父所派遣的光榮之主。
禱文的結尾（26）呼應第13章的開端，作為這篇臨別教導的總結。事實上，福音作者在13:1已經用這些話介紹這次最後晚餐：「祂既然愛了世上屬於自己的人，就以圓滿的愛來愛他們。」現在26節是「我已使他們認識祢的名……為使祢愛我的愛存留在他們內，我也在他們內」。「我使他們認識祢的名」，這個行動指即將發生在耶穌身上的連串苦難事件，祂是如此毫不懷疑地、有力地顯示祂對天父的愛，直至死亡；祂的愛便顯示了天主的名。